小动物活体成像的实验及标记技术分类
更新时间:2022-04-27 点击次数:1435
小动物活体成像的实验主要分为两大类,一种是看肿瘤或者炎症的发展以及肿瘤的转移。一种是看物质在小鼠体内的代谢和聚集情况。比如药物代谢,基本上是要看不同的时间内,注射进入小鼠体内的药物到了小鼠的哪个部分的器官以及量的多少。
那么如果单纯是细胞或者是药物,我们本身是无法看见的。这就牵扯到,我们需要用到一些,可以被影像设备捕捉到的发光物质,对细胞或者药物进行标记。从而指示细胞或者药物在小鼠中存在的位置。
小动物活体标记技术主要分为两种,一种是生物发光,一种是荧光。生物发光是通过荧光素酶(Luciferase)基因标记细胞或者DNA。在拍照前注射进底物,通过化学反应进行自发光。这种方法,不需要激发光,具有特异性强,背景低等优点。缺点是,信号太弱,需要比较长的曝光时间,以及比较好的设备。
荧光的主要采用报告基因(GFP,YFP,RFP)等。需要不同颜色的激发光源进行激发,并且在信号进行接收之前,要通过相对应的发射滤光片将杂光进行过滤,尽可能只是将激发信号放进来。GFP蓝光激发,显绿色,YFP绿光激发显黄颜色,RFP黄光激发显示红色。所以举个例子,GFP就需要蓝色光源激发,需要绿色滤光片进行过滤。
除此之外在药物代谢实验中,经常用到的一些荧光染料,用于对药物进行标记。我们可以很容易的在网上查到这些染料的激发波长和发射波长。