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说一说荧光成像与生物发光成像的区别

发布时间:2022-08-08      点击次数:199
  生物发光(Bioluminescence),作为一种自然界常见的发光现象,早在晋朝就已被用于借光夜读,留下了囊萤映雪的千古佳话。而在信息与技术飞速发展的现在,生物发光由于具有特异性强、无光毒性干扰及成像灵敏度高等优点,又逐渐成为生命科学成像研究的利器。
  尽管同样源自自然界的发光现象,但生物发光无论是在发光原理还是应用特点等方面都与荧光有着显著差别。生物发光成像对整个系统的避光性、光效率、稳定性等都具有较高的要求,这使得传统的荧光显微镜在成像质量、使用体验等方面都难以满足其需求。
说一说荧光成像与生物发光成像的区别:
  一、荧光成像技术优点:
  1、荧光蛋白及荧光染料标记能力更强
  荧光标记分子种类繁多,包括荧光蛋白、荧光染料、量子点标记等,可以对基因、蛋白、抗体、化合药物等进行标记。应用范围极广,可以对样本进行多色标记,一个样本同时获得多种细胞或药物的分布。
  2、信号强度高
  荧光成像的光子强度较生物发光更强,持续时间长,对CCD的灵敏度要求相对较低,无需必配低温冷CCD,即可获得清晰成像结果。
  3、从活体到离体均可成像
  相比生物发光只能在活细胞内才会发光。荧光蛋白或荧光染料只需保持荧光基团稳定即可稳定发光,并可在活体或离体组织器官进行观察。在实验前期荧光材料制备阶段,可以直接在EP管中进行成像观察。
  二、生物发光技术优点:
  1、特异性强,无自发荧光
  以荧光素酶作为体内报告源的生物发光方法,特异性较强。由于动物本身没有任何自发光,生物发光具有极低的背景和较高的信噪比。
  2、高灵敏度
  生物体内很多物质在激发光的照射下,也会发出荧光,这些非特异性荧光背景会影响检测灵敏度。
  3、精确定量
  由于荧光素酶基因是插入细胞染色体中稳定表达的,单位细胞的发光数量、发光条件相对稳定。即使标记细胞在动物体内有复杂的定位,亦可从动物体表的信号水平测量出发光细胞的相对数量。
  荧光成像和生物发光技术,互为补充,分别满足不同的研究领域。对于不同的研究,可根据两者的特性及实验要求选择。
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